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　　4月12日，科技創(chuàng)新情報(bào)SaaS服務(wù)商智慧芽旗下智慧芽創(chuàng)新研究中心正式發(fā)布《醫(yī)藥生物系列報(bào)告之四——基因測(cè)序前沿技術(shù)洞察報(bào)告》(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“報(bào)告”)。該報(bào)告結(jié)合基因測(cè)序相關(guān)的國(guó)內(nèi)外公開(kāi)資料/文獻(xiàn)、專(zhuān)利文獻(xiàn)、企業(yè)官方資料等，詳細(xì)介紹了基因測(cè)序的基本情況，并分析研究了納米孔測(cè)序技術(shù)發(fā)展、納米孔測(cè)序企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)格局以及納米孔測(cè)序技術(shù)未來(lái)展望等。

　　報(bào)告顯示，全球納米孔測(cè)序技術(shù)領(lǐng)域的相關(guān)專(zhuān)利量共約8.8千件。從整體趨勢(shì)上看，自 2011年起，相關(guān)技術(shù)專(zhuān)利量呈現(xiàn)逐年增加的態(tài)勢(shì)，2019年專(zhuān)利申請(qǐng)量達(dá)到頂峰，近兩年專(zhuān)利申請(qǐng)略有回落�？椎鞍缀涂厮俚鞍鬃鳛榧{米孔測(cè)序技術(shù)的核心技術(shù)，目前對(duì)納米孔的研究熱度高于機(jī)動(dòng)蛋白。此外，納米孔測(cè)序領(lǐng)域的主要技術(shù)掌握在美英中三國(guó)。其中，美國(guó)是該領(lǐng)域?qū)＠�申�?qǐng)量最多的國(guó)家，英國(guó)發(fā)展速度最快，而近幾年中國(guó)則在納米孔測(cè)序技術(shù)領(lǐng)域呈現(xiàn)出蓬勃發(fā)展的態(tài)勢(shì)。與此同時(shí)，美國(guó)、歐洲是當(dāng)前納米孔測(cè)序技術(shù)應(yīng)用最廣泛的目標(biāo)市場(chǎng)。未來(lái)，中國(guó)在政策、市場(chǎng)與技術(shù)的三方驅(qū)動(dòng)下，有望引發(fā)市場(chǎng)格局重新洗牌，從行業(yè)上游彎道超車(chē)，搶占更大的基因測(cè)序市場(chǎng)。

　　第四代基因測(cè)序技術(shù)——納米孔測(cè)序技術(shù)發(fā)展

　　基因測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)對(duì)生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)的發(fā)展起到了革命性的作用，該技術(shù)能夠直接對(duì)人體或病原微生物進(jìn)行檢測(cè)、定量及突變位點(diǎn)分析，彌補(bǔ)了細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、微生物與免疫學(xué)的短板，加深了對(duì)疾病(尤其是惡性腫瘤)的分子機(jī)制理解，在疾病診斷和治療方面有著重要作用。

　　其中，納米孔測(cè)序技術(shù)被認(rèn)為是第四代測(cè)序技術(shù)。在經(jīng)歷三大細(xì)節(jié)革新后：首先是單分子DNA從納米孔通過(guò);其次是納米孔上的酶對(duì)于測(cè)序分子在單核苷酸精度的控制;最后是單核苷酸的測(cè)序精度控制，成就了現(xiàn)今的納米孔測(cè)序儀的研制。2014年，牛津納米孔科技有限公司推出了首款商業(yè)化產(chǎn)品。

　　納米孔測(cè)序技術(shù)基本原理是將一個(gè)納米孔(Reader)固定在電阻膜上，在跨膜電場(chǎng)作用下，利用一個(gè)機(jī)動(dòng)蛋白(Motor/控速蛋白/動(dòng)力牽引蛋白)牽引DNA單鏈從負(fù)極向正極移動(dòng)時(shí)通過(guò)納米孔，由于納米孔的直徑非常細(xì)小，通常僅可以讓單個(gè)堿基通過(guò)，因此不同堿基通過(guò)納米孔時(shí)對(duì)電流的干擾不同，通過(guò)捕獲電流變化來(lái)識(shí)別和確認(rèn)堿基序列，從而實(shí)現(xiàn)測(cè)序(如圖1)。

　　圖1：納米孔測(cè)序基本原理(資料來(lái)源網(wǎng)絡(luò)，智慧芽整理)

　　值得一提的是，第一代Sanger雙脫氧終止法測(cè)序技術(shù)誕生后，建立了測(cè)序界的四項(xiàng)黃金標(biāo)準(zhǔn)，即測(cè)序結(jié)果高精度、高通量、長(zhǎng)片段和低費(fèi)用。截止目前的測(cè)序技術(shù)尚無(wú)法同時(shí)達(dá)到四項(xiàng)黃金標(biāo)準(zhǔn)的要求，而納米孔測(cè)序技術(shù)的誕生被認(rèn)為是最有望實(shí)現(xiàn)測(cè)序界黃金標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)之一。

　　美英中三國(guó)掌握納米孔測(cè)序核心專(zhuān)利

　　報(bào)告顯示，納米孔測(cè)序全球累計(jì)相關(guān)專(zhuān)利申請(qǐng)約8800件。整體來(lái)看，納米孔測(cè)序技術(shù)發(fā)展呈線性增長(zhǎng)趨勢(shì)，其中2011年相關(guān)專(zhuān)利申請(qǐng)量較2010年專(zhuān)利申請(qǐng)量出現(xiàn)明顯增長(zhǎng)(如圖2)。究其原因，很可能是2011年左右納米孔測(cè)序技術(shù)取得重大技術(shù)突破。公開(kāi)資料顯示，2012年牛津納米孔科技公司首次公開(kāi)系列納米DNA測(cè)序和蛋白質(zhì)分析相關(guān)數(shù)據(jù)，并對(duì)其后續(xù)發(fā)布產(chǎn)品GridION和MinION的軟件及硬件系統(tǒng)進(jìn)行了概述;其公開(kāi)數(shù)據(jù)包括已經(jīng)使用納米孔測(cè)序技術(shù)完成的數(shù)百萬(wàn)個(gè)堿基序列，這也是自納米孔測(cè)序理論誕生以來(lái)，世界上首次公開(kāi)納米孔測(cè)序數(shù)據(jù)。此后納米孔測(cè)序技術(shù)專(zhuān)利申請(qǐng)量持續(xù)保持快速增長(zhǎng)的發(fā)展勢(shì)頭。

　　圖2：過(guò)去20年全球納米孔測(cè)序技術(shù)相關(guān)專(zhuān)利申請(qǐng)與授權(quán)量演變(數(shù)據(jù)來(lái)源：智慧芽)

　　進(jìn)一步分析納米孔測(cè)序技術(shù)專(zhuān)利申請(qǐng)人(專(zhuān)利權(quán)人)所在國(guó)家/地區(qū)：美國(guó)在該領(lǐng)域技術(shù)產(chǎn)出遙遙領(lǐng)先于其他國(guó)家，專(zhuān)利申請(qǐng)總量達(dá)4700多件，英國(guó)和中國(guó)緊隨其后，英國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)總量約1200多件，中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)總量1000余件;其他國(guó)家如瑞士、德國(guó)、日本、比利時(shí)、韓國(guó)、加拿大等國(guó)雖然也有技術(shù)儲(chǔ)備，但是明顯數(shù)量較少(如圖3)。

　　圖3：過(guò)去20年納米孔測(cè)序技術(shù)實(shí)力TOP10國(guó)家(數(shù)據(jù)來(lái)源：智慧芽)

　　比較三大技術(shù)強(qiáng)國(guó)(美國(guó)、英國(guó)、中國(guó))技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)可知，美國(guó)技術(shù)產(chǎn)出略早、專(zhuān)利申請(qǐng)總量最高，但英國(guó)專(zhuān)利平均專(zhuān)利增長(zhǎng)率最高(如圖4)。近十年來(lái)美國(guó)在該領(lǐng)域年平均專(zhuān)利申請(qǐng)量約388件、英國(guó)在該領(lǐng)域年平均專(zhuān)利申請(qǐng)量約108件，中國(guó)在該領(lǐng)域年平均專(zhuān)利申請(qǐng)量約92件;但是從平均專(zhuān)利增長(zhǎng)率來(lái)看，英國(guó)在該領(lǐng)域研究產(chǎn)出增速最快(平均專(zhuān)利增長(zhǎng)率為146%)，中國(guó)研究產(chǎn)出增速稍遜于英國(guó)(平均專(zhuān)利增長(zhǎng)率123.5%)，美國(guó)最低(平均專(zhuān)利增長(zhǎng)率為100.8%)(平均專(zhuān)利增長(zhǎng)率定義為年專(zhuān)利申請(qǐng)量除以前年專(zhuān)利申請(qǐng)量的均值)。

　　圖4：過(guò)去20年納米孔測(cè)序技術(shù)中美英三國(guó)歷年專(zhuān)利申請(qǐng)量對(duì)比(數(shù)據(jù)來(lái)源：智慧芽)

　　中國(guó)市場(chǎng)潛力巨大，有望從行業(yè)上游彎道超車(chē)

　　利用納米孔研究出新型的快速、準(zhǔn)確、低成本、高精度及高通量的DNA測(cè)序技術(shù)是后人類(lèi)基因組計(jì)劃的熱點(diǎn)之一。

　　從納米孔測(cè)序技術(shù)路線發(fā)展趨勢(shì)來(lái)看，生物納米孔在一定時(shí)期內(nèi)仍將是主流，短期內(nèi)(預(yù)計(jì)3-5年之內(nèi))較難有成熟的固態(tài)孔技術(shù)出現(xiàn)，主要原因包括固態(tài)孔技術(shù)本身還不成熟，且存在過(guò)孔檢測(cè)的速度控制問(wèn)題。而從納米孔測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用場(chǎng)景來(lái)看，除DNA測(cè)序外，納米孔的無(wú)須標(biāo)記、無(wú)須放大的單分子檢測(cè)技術(shù)還可以在RNA檢測(cè)、蛋白質(zhì)檢測(cè)等各種重大疾病的生物標(biāo)志物檢測(cè)方面得到應(yīng)用。

　　從納米孔技術(shù)測(cè)序的商業(yè)化應(yīng)用來(lái)看，還面臨著巨大挑戰(zhàn)，如提高通道的選擇性和靈敏度、控制DNA穿越速度及提高信噪比等。目前僅有英國(guó)牛津納米孔科技公司一家商業(yè)化成功，但其產(chǎn)品也存在迭代較慢/精度等問(wèn)題，導(dǎo)致未完全打開(kāi)市場(chǎng)，此外大多數(shù)海外企業(yè)也仍處于研究開(kāi)發(fā)階段。但值得一提的是，隨著中國(guó)基因測(cè)序領(lǐng)先企業(yè)齊碳科技的新產(chǎn)品即將正式推向市場(chǎng)，一方面有望從根本上改變我國(guó)基因測(cè)序設(shè)備嚴(yán)重依賴(lài)進(jìn)口的現(xiàn)狀，降低單次測(cè)序成本，讓即時(shí)檢測(cè)的基因測(cè)序技術(shù)走進(jìn)千家萬(wàn)戶，同時(shí)有望引領(lǐng)中國(guó)基因測(cè)序上游領(lǐng)域彎道超車(chē)，這或?qū)��?duì)國(guó)際基因測(cè)序儀生產(chǎn)制造巨頭造成沖擊，從而引發(fā)整個(gè)市場(chǎng)格局重新洗牌。

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