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　　2021年8月出版的《中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志》上，推出了中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會組織專家編寫的《流式細胞術(shù)檢測腦脊液腫瘤細胞的專家共識》。這篇共識由河北燕達陸道培醫(yī)院王卉主任和中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院劉貴建主任執(zhí)筆并擔(dān)任通訊作者，來自全國30多家三甲醫(yī)院的40多位專家經(jīng)過研究討論共同完成。

　　為了讓大家更好了解這篇共識，王卉主任做了解讀。

　　中樞神經(jīng)系統(tǒng)是多種造血及淋巴系統(tǒng)腫瘤和非造血系統(tǒng)腫瘤容易累及的部位，急性白血病中樞累及發(fā)生率30%左右，淋巴瘤累及率5%~25%。腦脊液檢測是評價腫瘤中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累的重要依據(jù)。長期以來認為細胞學(xué)檢查是金標準，然而細胞學(xué)檢查的敏感性較低，特別是在低細胞含量的樣本中敏感度更低，這些情況可能延誤患者的正確診斷和治療。

　　流式細胞術(shù)是上個世紀70年代問世的重要免疫學(xué)技術(shù)，尤其是近30年來在血液和免疫學(xué)領(lǐng)域取得快速進展，成為不可或缺的診斷工具。腦脊液檢測方法中，流式細胞術(shù)幾乎是目前所有技術(shù)中最快速、靈敏、實用的技術(shù)，可以極大程度提高腦脊液腫瘤細胞的檢出率。

　　鑒于腦脊液這種微量細胞標本的檢測不同于骨髓、外周血等常規(guī)標本，為了規(guī)范操作，減少因技術(shù)層面導(dǎo)致的假陰性、假陽性，提高檢測靈敏度和特異性，中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會組織制定了《流式細胞術(shù)檢測腦脊液腫瘤細胞的專家共識》(簡稱《共識》)

　　腦脊液檢測腫瘤細胞到底有多重要呢?

　　王卉主任舉了一個例子，十年前一個夜晚，北京一家大三甲醫(yī)院焦急的患者父親送來一份腦脊液標本。患兒是發(fā)熱和頸項僵直的狀態(tài)，臨床醫(yī)生首先考慮的是腦膜炎，王卉主任親自進行檢測，正常腦脊液中細胞較少，T淋巴細胞為主，以及少量單核細胞，其他細胞很難見到。該標本中發(fā)現(xiàn)了一群CD45陰性CD56陽性細胞。首先考慮非造血系統(tǒng)腫瘤細胞可能性大，后來連夜做了更多的標志證實為神經(jīng)母細胞瘤。及時反饋給臨床醫(yī)師，盡快進一步完善檢查，最后證實該診斷，患兒獲得及時正確的治療，至今狀態(tài)良好。

　　該病例腦脊液細胞數(shù)量增多不明顯，因此其他檢測結(jié)果不能提供幫助，流式成為第一個做出正確診斷提示的技術(shù)。

　　雖然流式細胞術(shù)檢測腦脊液非常重要，但是檢測的困難程度限制了該項目的廣泛臨床應(yīng)用。因此專家們就適用范圍、檢測方案、操作中注意事項、發(fā)出合理的報告等幾個方面詳盡提出推薦方法和推薦強度。

　　共識指出：急性白血病、淋巴瘤、轉(zhuǎn)移癌等多種淋巴造血和非造血腫瘤都有可能累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，因此急性白血病、有癥狀的其他腫瘤應(yīng)盡可能進行腦脊液的流式細胞術(shù)檢測。

　　由于腦脊液無法大量取材，細胞數(shù)量少，細胞存活時間短等特點，給該技術(shù)檢測帶來挑戰(zhàn)，因此操作和分析過程很重要。

　　腦脊液標本流式細胞術(shù)檢測的要點在于：

　　1、采集后盡快低溫送檢。最好不要超過4-8小時送到，實驗室接到標本后盡快處理。

　　2、處理過程中注意回收每一個細胞，尤其是標記、離心、洗滌的過程中，盡量使用尖底EP管或者試管，用吸管或者移液器去上清。

　　3、注意保持流式細胞儀的管道清潔。注意體現(xiàn)為日常儀器保養(yǎng)，以及上樣前注意沖洗進樣針和管道，避免管間污染。

　　4、方案設(shè)計中，注意覆蓋常見疾病重要診斷相關(guān)標志，并且因為胞漿染色處理過程復(fù)雜，容易丟失細胞，所以盡量使用胞膜抗體替代胞漿抗體，除非細胞量大，或者不可替代的情況下，才會使用胞漿抗體。

　　5、獲取前，使用血液標本調(diào)整好儀器條件，避免用珍貴的腦脊液標本調(diào)整儀器條件。

　　6、獲取過程中，注意盡可能收集所有腦脊液細胞。但是也要避免獲空。

　　7、分析過程中，注意正確識別非特異性染色、死細胞與真正的細胞。

　　8、報告的時候，因為腦脊液標本細胞數(shù)量少，而流式細胞術(shù)對于細胞檢測真實性有效性的判斷，一般是要求最少20-25個有效細胞(特殊情況下，有人提出10個細胞聚集、背景干凈，可以判斷有效)，因此除了報告腫瘤細胞的比例，還要求給出細胞數(shù)，就是為了準確判斷腫瘤負荷和報告的可靠性。比如同樣20%腫瘤細胞，一個報告是8個細胞，一個報告是2000個細胞，前者結(jié)果可信度不高，后者是有效報告。

　　鑒于臨床實際工作當(dāng)中，大家所用機型不一致，如四色流式、八色流式、十色流式，甚至20多色的全光譜流式。雖然目前主流機型是3激光8-10色，但是為了讓共識更具有適用性、可行性、普及性，筆者提供了不同方案供大家選擇。對于這種方案推薦，共識中尊重每一個單位，采取建議參考的方式。

　　共識中建議大家隨報告提供彩色圖片，因為腫瘤是一個重大疾病，治療過程漫長，患者經(jīng)常會轉(zhuǎn)院和會診，并根據(jù)初治免疫分型進行隨訪，所以經(jīng)常會需要報告供同行參考。彩色圖片是提供給同行參考的重要圖像依據(jù)。

　　總之，流式細胞術(shù)檢測腦脊液腫瘤細胞非常重要，為了更好地讓每個有條件的實驗室做好流式細胞術(shù)檢測腦脊液標本，王卉主任和劉貴建主任代表中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會組織眾多行業(yè)內(nèi)著名專家完成了這個共識。希望給臨床醫(yī)師提供快速、準確的報告，從而讓患者盡早獲得精確診斷和適當(dāng)治療。　　

　　王卉主任王卉個人簡歷

　　陸道培醫(yī)療集團(河北燕達陸道培醫(yī)院、北京陸道培醫(yī)院、北京陸道培血液病醫(yī)院)檢驗科副主任(副院長級)、流式細胞室主任，信納克(北京)生化標志物檢測醫(yī)學(xué)研究有限責(zé)任公司主任、CEO、CMO。從事流式細胞術(shù)檢測20年。取得4項國家發(fā)明專利，2項實用新型專利，3項作品登記。中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會流式細胞分析診斷專家委員會主任委員;北京醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)會血液和體液檢驗分會副會長;中國非公立醫(yī)療機構(gòu)協(xié)會血液委員會常委;中國臨床流式聯(lián)盟常委;中國抗癌協(xié)會淋巴瘤學(xué)組委員、中國血液免疫學(xué)會流式學(xué)組委員、中國生物工程學(xué)會細胞分析專委會委員，等。累計在全國和各省市學(xué)術(shù)會議上講座700余場，足跡遍布全國28個省、自治區(qū)、直轄市(包括臺灣);累計接收進修醫(yī)200名，來自全國26個省、自治區(qū)、直轄市(包括臺灣)。獨立簽發(fā)40萬臨床報告，每個月標本中40%是來自全國各地的疑難會診病例。